陶慧敏1966年出生于浙江温州瑞安，毕业于浙江艺术学校，现为南京军区政治部前线话剧团国家一级演员，中国电影表演艺术学会理事，江苏省青联常委，在她12岁的时候进入瑞安越剧团当演员，16岁时凭借《五女拜寿》和《美丽的囚徒》这两部影视剧作开始走进银幕。

1989年因参演电视剧《杨乃武与小白菜》被观众关注，因剧中小白菜一角，凭借精湛的演技赚足了观众的泪水，以致喜爱她的观众一提起陶慧敏第一时间就想到“小白菜”。

在电影版的《红楼梦》中饰演多愁善感林黛玉，而她演的林黛玉，把林黛玉的那种羞涩腼腆以及小心翼翼的形象演绎得淋漓尽致，许多网友纷纷表示简直太漂亮了，不愧是最美的林黛玉。

在《福禄双全》中扮演了一个性格似火的女主角，次年荣获江苏省十大杰出青年，江苏省新长征突击手称号，2004年荣获二等功，之后参演电视剧《追日》陶慧敏在剧中塑造了一名全新的女军人形象。

之后凭话剧《虎踞钟山》正式入围2003—2004年度国家舞台艺术精品工程初选剧目，2006年陶慧敏出席第十五届中国金鸡百花电影节颁奖典礼活动，在《霓虹灯下的哨兵》中一直以正面形象出现的陶慧敏首次以反派角色的特务曲曼丽形象出镜。

也许因为她是一个娇柔的南方水乡妹子的缘故，有许多导演邀请她演了不少苦情戏，陶慧敏她在《一不小心爱上你》中再度"苦情"，剧中饰演家境贫寒的妈妈万红霞，在《命运交响曲》中饰演安琪、安娜两姐妹的母亲“郝星雨”。

之后出演都市情感伦理剧《真爱无敌》在剧中饰演一个很爱发飙、喝酒的妈妈，直到2014年陶慧敏领衔主演的励志电影《抱养奇缘》影片中的陶慧敏一改以往的温婉形象，不仅要扮老还要扮丑，出演一个百般刁难、蛮不讲理的农村妇女叶兰。

陶慧敏给人一种秀外慧中的感觉，荧屏前的她温婉尔雅，她所饰演的各种角色信手拈来游刃有余，尤其是在不少家庭剧中成功塑造了“真善美”的传统母亲形象，让她成为观众喜爱的“母亲专业户”，陶慧敏天生丽质楚楚动人，她所饰演的角色形象给人有一种古典美女的感觉。